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技术服务

基因编辑检测(基于一代测序)

根据靶点位置设计特异性检测引物，然后对转基因阳性苗进行PCR扩增和一代测序;根据测序结果以及参考序列的解读分析，鉴定出编辑形式。

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侧翼序列分离

基因组步移策略常用于获取基因全序列信息或T-DNA插入片段侧翼序列信息。FNPI-PCR(融合引物巢式 PCR)通过设计特异性序列与高度简并的9条融合简并引物，分别与基因特异性引物完成PCR反应，获得已知序列的侧翼序列信息。相比较常用的Tail-PCR而言，具有扩增片段长、耗时短、特异性高等优点。本服务利用上述方法快速获得转基因材料的侧翼序列。

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Southern Blot 拷贝数分析

Southern blot 是将植物基因组总DNA酶切，通过琼脂糖凝胶电泳分离，变性之后利用虹吸原理印记到尼龙膜上，然后与变性的标记探针特异性地在一定温度下退火，最后根据探针信号情况分析杂交结果的分子生物学技术。Southern blot 可用于多种实验目的，比如检测目的片段拷贝数，基因突变分析，限制性片断长度多态性分析等。

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qPCR 检测

实时荧光定量PCR技术(Real-time PCR)是在定性PCR技术基础上发展起来的核酸定量技术，在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，使每一个循环变得“可见”，最后通过Ct值和标准曲线对样品中的 DNA(or CDNA)的起始浓度进行定量的方法。

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茄子遗传转化

以三月茄下胚轴作为转化受体材料，用携带目标基因载体侵染受体材料，经过抗生素(kan)筛选，最终获得转基因株系。

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草坪草遗传转化

以草坪草种子诱导的愈伤作为转化受体材料，用携带目标基因载体侵染受体材料，经过抗生素(hpt)筛选，最终获得转基因株系。

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西瓜/甜瓜遗传转化

以西瓜/甜瓜子叶作为转化受体材料，用携带目标基因载体侵染受体材料，经过抗生素(basta)筛选，最终获得获得大量过表达、RNAi、基因编辑转基因植株。

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马铃薯遗传转化

本技术平台具有成熟的马铃薯遗传转化体系，通过农杆菌介导的侵染法已成功获得大量过表达、RNAi、基因编辑转基因植株。

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首蓿遗传转化

以紫花苜蓿或者蒺藜苜蓿无菌苗的叶片作为转化受体材料，用携带目标基因载体侵染受体材料，经过抗生素(kan或 hpt)筛选，最终获得获得大量过表达、RNAi、基因编辑转基因植株。

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