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种子纯度及真实性、F1 杂种真实性鉴定

充分了解品系纯度和真实性,对于新品种审定、保护及种质材料评价等具有重要意义。通过SSR或SNP分子标记分析 DNA水平上的差异来鉴定品种纯度,具有准确度高、速度快、操作简单等优点,因而被广泛应用。

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亲本及家系选择

实生选种和杂交育种是选育新品种最常见的方法。实生选种简单快捷,但缺乏父本信息。杂交育种周期长,由于育种园的更替和变迁、实验记录遗失等原因,常会造成亲本信息缺失的现象,给优良品种的知识产权保护育种谱系建立带来困难,也给深入认识优良性状的形成机制和遗传规律带来不便。

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性状连锁标记开发及辅助选择

利用分子标记与目标性状基因紧密连锁的特点,通过检测分子标记,来进一步检测目标候选基因的存在,从而达到选择目标性状(如高产、稳产、优质、抗逆等)的目的。

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种质资源遗传多样性评估及背景分析

遗传多样性分析为研究物种起源、品种分类、亲本选配和品种保护提供了科学依据,是收集、保护和有效利用种质资源的技术基础,有利于培育出更优良的品种。分子标记技术因其具有较高的多态性,可以更好地应用于种质资源鉴定,是种质资源材料鉴定、种质资源保护的重要手段。

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原核表达蛋白纯化

大肠杆菌表达系统目前仍然是许多异源蛋白表达的选择,因为大肠杆菌操作简单、易于培养、获得的目标蛋白表达量大、成本较低以及实验周期短等优势。其主要流程包括:原核表达载体的构建一转化到高效表达的宿主菌一目的蛋白的诱导表达一细菌的扩大培养→制备细菌蛋白粗提物一目的蛋白质的纯化。

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GST Pull-down

Pul down 技术用固相化的、已标记的饵蛋白或标签蛋白(生物素、PolyHis-或 GST),从细胞裂解液中钓出与之相互作用的蛋白。通过 Pul-down 技术可以确定已知的蛋白或已纯化的相关蛋白间的相互作用关系,从体外检测出蛋白相互作用关系。

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Co-IP 免疫共沉淀

免疫共沉淀技术(Co-lmmunoprecipitation,Co-IP)是一种研究两种蛋白在体内是否存在相互作用的有效方法,通过抗体和已知蛋白结合,从而捕获整个已知蛋白复合物,进而研究复合物中与己知蛋白存在相互作用的蛋白

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凝胶迁移实验(EMSA)

凝胶迁移或电泳迁移率实验(ElectrophoreticMobility Shift Assay,EMSA)是一种研究蛋白质和DNA序列相互结合的技术,蛋白质可以与生物素标记的核酸探针结合,电泳时这种复合物比蛋白质结合的探针在凝胶中泳动的速度慢。

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荧光素酶互补实验

荧光素酶蛋白被切成N端和C端2个功能片段,即NLuc和 CLuc。待检测的2个目标蛋白分别与NLuc和CLuc融合,如果2个目标蛋白相互作用,则荧火素酶的NLuc和CLuc在空间上会足够靠近并正确组装,从而发挥荧火素酶活性,即分解底物产生荧光。

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