1、服务介绍:
Southern blot是将植物基因组总DNA酶切,通过琼脂糖凝胶电泳分离,变性之后利用虹吸原理印记到尼龙膜上,然后与变性的标记探针特异性地在一定温度下退火,最后根据探针信号情况分析杂交结果的分子生物学技术。Southern blot可用于多种实验目的,比如检测目的片段拷贝数,基因突变分析,限制性片断长度多态性分析等。
2、服务内容
(1)DNA检测、酶切、电泳、转膜
(2)杂交,洗脱和信号检测
3、服务结果
(1)实验报告
(2)杂交X-光片
转基因水稻的Southern blot分析(探针为epsps基因片段)
4、客户须知
(1)客户提供完整性良好的DNA样品(完整性检测以本公司检测结果为准),DNA 样品浓度需要在200 ng/μL以上;若检测的是外源基因则提供对应探针区序列,载体酶切图谱和10 ng原始转化质粒,及扩增探针所需引物(需说明探针片段长度、PCR退火温度);若检测的是植物内源基因,则提供对应探针区序列、携带对应探针区序列的质粒,扩增探针所需引物(需说明探针片段长度、PCR退火温度),及Southern blot希望使用的限制性内切酶信息等;
(2)客户提供原始样品时须-20℃保存,如需本公司代为提取DNA,费用另计,报价根据物种类型而定;
(3)不同作物所需提供DNA量见下表(请以qubit为准,nanodrop定量仅作参考):
名称 |
基因组大小(Mb) |
DNA杂交需求量(μg) |
植物叶片需求量(g) |
水稻 |
389 |
20 |
5 |
棉花 |
780 |
40 |
10 |
油菜 |
1130 |
50 |
10 |
玉米 |
2300 |
100 |
10 |
小麦 |
4500 |
200 |
20 |
大豆 |
1100 |
50 |
10 |
5、服务周期
客户提供溶解好的DNA,周期为15个工作日;如需要公司提取DNA,服务周期为40个工作日。